Recibe el nombre en conmemoración del Combate de Acoyte, producido en 1818. Allí 20 gauchos que pertenecían a las fuerzas de Martín Güemes, comandados por Bonifacio Ruiz de los Llanos, derrotaron a 200 soldados realistas comandados por el General Olañeta.
La avenida nace en el área comercial del barrio de Caballito cerca del Parque Rivadavia, a partir de la Avenida Rivadavia siendo continuación de la Avenida José María Moreno (ubicada hacia el sur de Rivadavia). En ésta esquina se encuentra la estación Acoyte de la Línea A del Subte de Buenos Aires.
Con sentido sur-norte, recorre hacia el norte del barrio de Caballito; cruza la Avenida Avellaneda, transcurre por la fachada del Sanatorio Municipal Dr. Julio Méndez, y pasa por inmediaciones del Parque Centenario hasta la Avenida Ángel Gallardo. A partir de este punto, ingresa al barrio de Villa Crespo, recorriendo 6 cuadras más, y finalizando en la Avenida Warnes. Dado que las calles que intersectan Avenida Warnes cambian de nombre, en el caso de Acoyte su continuación es la Calle Muñecas.